Surowica badana w odczynie wiązania dopełniacza powinna być świeża, niezhemolizowana, czysta i wolna od morfotycznych składników krwi. Celem zapobiegania jej własnościom antykomplementarnym przygotowuje się ją tak, by nie była przerośnięta drobnoustrojami oraz nie zawierała domieszek substancji chemicznych. Zależnie od zastosowanej techniki można badać surowicę świeżą (odczyn Hecht—Demanche’a, odczyn Hecht—Muttermilcha, odczyn Hechta w modyfikacji Ronchisa, i inne) lub, co ostatnio się najczęściej stosuje, surowicę inaktywowaną, a więc ogrzaną przez 30 min. w temp. 56°. Celem inaktywowania surowic jest unieczynnienie zawartego w nich dopełniacza, stabilizacja chwiejnych globulin oraz zmniejszenie własności antykomplementarnych. Surowica inaktywowana powinna być badana tego samego dnia. Jeśli to nie nastąpi, musi być powtórnie inaktywowana w dniu badania przez 10 min. w temp. 56°.